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IHC未染色或無信號的原因：一、?抗體問題?：抗體與一抗或二抗不兼容、抗體濃度不合適、抗體失效或儲存不當(dāng)?shù)榷紩?dǎo)致無染色。例如，使用抗一抗種屬來源的二抗，確認(rèn)二抗是否識別一抗的亞型；使用更高濃度的抗體或延長孵育時間；設(shè)置陽性對照，確?？贵w仍然有效?。二、?抗原修復(fù)不足?：固定步驟可能會改變抗體識別的抗原表位，導(dǎo)致抗原修復(fù)不足。使用微波或壓力鍋進(jìn)行抗原修復(fù)，確保使用新鮮配置的修復(fù)液?。三、?樣本處理不當(dāng)?：樣本存放時間過長、切片制備不當(dāng)（如脫蠟不ce底）、組織切片干片等都會影響...

一、蛋白芯片簡介?蛋白芯片?是一種高通量的蛋白質(zhì)功能分析檢測技術(shù)，主要用于監(jiān)測蛋白質(zhì)之間的相互作用。其基本原理是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于載體上，然后利用標(biāo)記了特定熒光物質(zhì)的抗體與芯片上的蛋白質(zhì)結(jié)合，通過熒光強(qiáng)度分析蛋白質(zhì)的表達(dá)數(shù)量和相互作用關(guān)系?。二、蛋白芯片的工作原理蛋白芯片通過將已知的蛋白質(zhì)分子固定在固相載體上，然后捕獲與之特異性結(jié)合的待測蛋白質(zhì)。這些待測蛋白質(zhì)可能存在于血清、血漿、尿液等生物樣本中。通過洗滌和純化步驟后，利用熒光掃描儀或激光共聚掃描技術(shù)測定各點的熒光強(qiáng)度...

本文介紹一下用勻漿器研磨法提取貼壁細(xì)胞核蛋白的具體操作。一、前期準(zhǔn)備1、臺盼藍(lán)染液：取臺盼藍(lán)粉劑，將其溶解在10mL的雙蒸水當(dāng)中配制成質(zhì)量體積比為4%（4%w/v）的臺盼藍(lán)母液。在使用時，利用PBS緩沖液將母液稀釋10倍，使其濃度達(dá)到0.4%，之后再與細(xì)胞懸液混合均勻。2、BufferA：包含10mmol/L的HEPES（在4℃下pH值為7.9）、1.5mmol/L的氯化鎂、10mmol/L的KCL、0.5mmol/L的二硫蘇糖醇（DTT）。若擔(dān)心漿蛋白降解會對核蛋白產(chǎn)生影響...

一、光學(xué)顯微鏡觀察凋亡細(xì)胞的主要特征為核染色質(zhì)致密深染，形成致密質(zhì)塊，有時可碎裂。檢測方法：細(xì)胞涂片或組織石蠟切片作HE染色或Giemsa染色，在高倍物鏡下觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)改變，結(jié)合顯微測量工具可作凋亡細(xì)胞計數(shù)。二、視頻時差顯微技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中常用，通過相差顯微鏡可動態(tài)觀察細(xì)胞凋亡的變化過程，尤其是觀察細(xì)胞表和外形的變化。檢測方法：收集2×10^5細(xì)胞/ml培養(yǎng)的細(xì)胞，置于多孔培養(yǎng)板，加入凋亡誘導(dǎo)劑，在帶有自動攝像裝置的相差顯微鏡下觀察凋亡細(xì)胞的動態(tài)改變，每隔1分鐘作序列攝影...

PCR實驗中產(chǎn)生的嵌合體你知道是什么呢？它怎么產(chǎn)生的呢？那又如何預(yù)防和處理呢？這篇文章讓我們一起了解一下吧！一、PCR嵌合體是什么PCR嵌合體(ChimericProducts)：PCR擴(kuò)增反應(yīng)中的嵌合體是指一個PCR產(chǎn)物來自兩個或多個模板分子，通常是由于延伸未完quan導(dǎo)致的?。這種現(xiàn)象通常發(fā)生在PCR反應(yīng)中，特別是當(dāng)使用多重PCR或復(fù)雜模板時。嵌合體會導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物中含有非預(yù)期的片段，有可能會影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，甚至導(dǎo)致錯誤的解釋。二、形成原理在PCR反應(yīng)中，DNA模板在...